近年來，隨著研究的進(jìn)展，人類對(duì)腫瘤和免疫的認(rèn)知越來越深刻，免疫療法也由此蓬勃發(fā)展。在抗體藥物研發(fā)方面，從1986年FDA批準(zhǔn)第一款治療性單克隆抗體藥物上市以來，全球已累計(jì)超100款抗體藥物上市，這類藥物革新了自身免疫性疾病、腫瘤等多種疾病的治療。

       在技術(shù)迭代方面，雙特異性抗體接連獲得突破的同時(shí)，在差異化研發(fā)的背景下，三特異性抗體也拉開了序幕。那么什么是三抗？目前研發(fā)進(jìn)展如何？

       何謂三抗？

       三抗擁有三種特異性抗原結(jié)合位點(diǎn)，可以同時(shí)與靶細(xì)胞與功能細(xì)胞相互作用，進(jìn)而增強(qiáng)對(duì)靶細(xì)胞的殺傷。三抗不僅能像雙抗一樣，與靶細(xì)胞相關(guān)抗原和激活功能細(xì)胞的受體相結(jié)合，還能夠與功能細(xì)胞表面的另一個(gè)靶點(diǎn)相結(jié)合，有利于將藥物重定向至腫瘤局部，增加結(jié)合特異性，提升藥物靶向腫瘤細(xì)胞的準(zhǔn)確性，降低脫靶毒 性，增強(qiáng)抗腫瘤能力。

       三抗一般使用可變結(jié)構(gòu)域基因創(chuàng)建，與雙抗相比，具有更廣闊的應(yīng)用空間，可以達(dá)到同時(shí)橋接并激活免疫細(xì)胞，或橋接免疫細(xì)胞并阻斷雙信號(hào)通路等作用；其中，同時(shí)橋接與激活免疫細(xì)胞這種機(jī)制與人體免疫系統(tǒng)息息相關(guān)，對(duì)靶細(xì)胞有著很強(qiáng)的殺傷作用。

       三抗藥物研發(fā)進(jìn)展

       目前，全球尚無三抗藥物獲批上市，不過已有一批企業(yè)參與三抗的研發(fā)。

       部分臨床在研三抗產(chǎn)品（資料來源：公開資料整理）

       Harpoon Therapeutics：HPN536

       HPN536是Harpoon Therapeutics研發(fā)的一款靶向CD3/MSLN/HAS的三特異性抗體，可與表達(dá)間皮素的腫瘤細(xì)胞及T細(xì)胞上的CD3結(jié)合從而導(dǎo)致T細(xì)胞活化和有效的重定向靶細(xì)胞裂解，目前正在進(jìn)行針對(duì)實(shí)體瘤的II期臨床試驗(yàn)。

       其中MSLN（間皮素）是一種糖基磷脂酰肌醇（GPI）錨定的細(xì)胞表面糖蛋白，在正常組織中低表達(dá)的同時(shí)在許多癌癥中過度表達(dá)，作為一種腫瘤特異性抗原成為了腫瘤治療的理想靶點(diǎn)之一。

       除HPN536外，Harpoon Therapeutics還研發(fā)了靶向CD3/PSMA/HAS 的三抗HPN424以及靶向CD3/BCMA/HAS的HPN217。

       Dragonfly Therapeutics：DF1001

       DF1001是Dragonfly Therapeutics研發(fā)的同類首 創(chuàng)的三特異性NK細(xì)胞結(jié)合療法，其利用HER2作為錨點(diǎn)來調(diào)節(jié)先天性和適應(yīng)性免疫；通過重定向NK和CD8+ T細(xì)胞以重新編程腫瘤微環(huán)境，使冷腫瘤變熱。在今年ASCO會(huì)議上公布的研究結(jié)果顯示，36例晚期/難治性實(shí)體瘤患者接受了劑量遞增治療，68例接受了安全性/藥效學(xué)擴(kuò)展治療。在5例患者中觀察到部分緩解（PR），持續(xù)時(shí)間長達(dá)13個(gè)月。22例患者疾病穩(wěn)定（SD)，臨床受益率（CBR）為39.7%，應(yīng)答者包括難治性肺癌和乳腺癌患者。安全性方面，79%的患者報(bào)告了治療相關(guān)不良事件（TRAE），TRAEs大多為1-2級(jí)。

       在這項(xiàng)劑量遞增研究中，DF1001單藥治療在HER2+難治性實(shí)體瘤患者中顯示出有潛力的抗腫瘤活性。這一數(shù)據(jù)支持研究人員進(jìn)一步探索DF1001單藥治療和聯(lián)用，以作為實(shí)體瘤患者的潛在新型治療選擇。

       賽諾菲：SAR443216、SAR442257

       賽諾菲在三抗藥物的布局由來已久，除了SAR443579外，還有SAR443216和SAR442257。

       SAR443216靶向CD3/CD28/HER2，其不僅能利用CD8+ T細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞進(jìn)行直接殺傷，而且會(huì)通過CD4+ T淋巴細(xì)胞抑制乳腺癌細(xì)胞的生長，為HER2乳腺癌的治療提供了新的藥物開發(fā)可能，并探索了CD4+ T細(xì)胞前所未有的新機(jī)制。目前該藥物處于I期臨床試驗(yàn)階段。

       SAR442257靶向CD3/CD28/CD38，是在傳統(tǒng)CD3雙抗的基礎(chǔ)上引入CD28，形成同時(shí)靶向CD3/CD28/CD38的三抗。其除了與CD3受體結(jié)合，還攜帶了與共刺激受體CD28結(jié)合的蛋白域，同時(shí)激活CD28信號(hào)通路可以促進(jìn)激活后T細(xì)胞的生存以及產(chǎn)生T細(xì)胞記憶。在體外試驗(yàn)中，SAR442257表現(xiàn)出比CD38單克隆抗體高1000~10000倍的骨髓瘤細(xì)胞殺傷活性，擬用于治療復(fù)發(fā)/難治性多發(fā)性骨髓瘤（MM）和非經(jīng)典霍奇金淋巴瘤（NHL）患者。

       基石藥業(yè)/ Numab Therapeutics：ND021

       ND021是由基石藥業(yè)和Numab共同開發(fā)的一款靶向PD-L1/4-1BB/HAS的三抗藥物，其由三個(gè)穩(wěn)定抗體Fv片段組成，可同時(shí)結(jié)合PD-L1、4-1BB和人血清蛋白（HSA）三個(gè)靶點(diǎn)。根據(jù)設(shè)計(jì)，ND021僅在與腫瘤細(xì)胞表面上的PD-L1結(jié)合時(shí)才會(huì)與4-1BB的獨(dú)特抗原表位相結(jié)合，激活抗腫瘤T細(xì)胞，從而可避免出現(xiàn)傳統(tǒng)4-1BB激動(dòng)劑單抗在人體試驗(yàn)中觀察到的肝毒 性。另外，通過結(jié)合HSA，ND021可擁有更長的半衰期，從而降低患者的給藥頻率。還有望克服對(duì)PD-1/L1抗體的原發(fā)性和繼發(fā)性耐藥。因此，ND021有成為同類最 佳藥物的潛力。

       在2022 AACR年會(huì)上，基石藥業(yè)公布了ND021的臨床前研究數(shù)據(jù)，結(jié)果表明：ND021單藥療法在冷、熱腫瘤模型中均有療效；與CD3 T細(xì)胞誘導(dǎo)劑聯(lián)合使用可增強(qiáng)抗腫瘤活性，促進(jìn)腫瘤內(nèi)部CD8記憶T細(xì)胞形成；藥代動(dòng)力學(xué)/藥效學(xué)模型數(shù)據(jù)顯示，ND021可在較寬的劑量范圍內(nèi)同時(shí)達(dá)到最 佳的PD-L1抑制與4-1BB激活，從而有利于臨床劑量的選擇。

       博銳生物/恩沐生物：BR110

       BR110是恩沐生物基于其TRIAD平臺(tái)開發(fā)的一款三抗產(chǎn)品，博銳生物已與其達(dá)成獨(dú)家合作和授權(quán)。BR110靶向CD3/CD19/CD20，能夠同時(shí)靶向T細(xì)胞表面的CD3以及腫瘤細(xì)胞上的兩個(gè)不同的生物標(biāo)志物CD19和CD20，通過募集T細(xì)胞殺死表達(dá)CD19和/或CD20的腫瘤細(xì)胞。

       有研究表明，R-CHOP治療淋巴瘤復(fù)發(fā)患者有近30%存在CD20丟失或下調(diào)，CAR-T治療淋巴瘤也普遍存在CD19丟失或下調(diào)。針對(duì)以上現(xiàn)象，由于BR110與腫瘤細(xì)胞表面的CD19和CD20具有很高的親和力，因此可有效解決其他單一靶向療法因靶點(diǎn)丟失或下調(diào)導(dǎo)致耐藥或復(fù)發(fā)問題，不僅可以靶向CD19+/CD20+的彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤（DLBCL），還可以針對(duì)CD19-/CD20+和CD19+/CD20痕量表達(dá)的DLBCL。

       嘉和生物：GB263T

       GB263T是嘉和生物研發(fā)的一款靶向EGFR/cMET/cMET的三特異性抗體，能夠靶向EGFR和兩個(gè)不同cMET表位，這一設(shè)計(jì)是為了增強(qiáng)其安全性和有效性。因此，GB263T具有高度差異化的設(shè)計(jì)，表現(xiàn)出多種作用機(jī)制，可同時(shí)抑制原發(fā)性及繼發(fā)性EGFR突變及cMET信號(hào)通路，下調(diào)EGFR與cMet蛋白表達(dá)水平，并有效誘導(dǎo)EGFR及cMet的內(nèi)吞。

       臨床前研究表明，GB263T有效阻斷了EGFR和cMET的配體誘導(dǎo)磷酸化，并顯示出對(duì)EGFR和cMET信號(hào)通路較好的雙重抑制。同時(shí)，GB263T有效誘導(dǎo)了EGFR和cMET的內(nèi)吞，并顯著降低EGFR與cMET的蛋白表達(dá)水平。在EGFR外顯子20插入、EGFR外顯子19缺失，以及C797S突變和各種cMET表達(dá)異常等幾種不同的腫瘤模型中，GB263T均表現(xiàn)出顯著的劑量依賴性腫瘤抑制作用。

       百利藥業(yè)：GNC-038、GNC-035、GNC-03

       在三抗嶄露頭角的同時(shí)，四抗藥物也開始興起。四抗藥物通過引導(dǎo)并調(diào)控活化后的免疫細(xì)胞浸潤并靶向攻擊腫瘤組織和腫瘤細(xì)胞，最后形成可有效抑制和清除腫瘤的“腫瘤特異性的激發(fā)型免疫亞穩(wěn)態(tài)”，有望實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤的治療。百利藥業(yè)是四抗領(lǐng)域知名的生物醫(yī)藥企業(yè)，擁有多特異性抗體GNC技術(shù)平臺(tái)，可以在IgG基礎(chǔ)上串聯(lián)3個(gè)scFv搭建成對(duì)稱的四特異性抗體。

       GNC-038是首 個(gè)獲批進(jìn)入臨床的四特異性抗體藥物，具有靶向CD19、CD3、PD-L1和4-1BB四個(gè)抗原的結(jié)構(gòu)域，通過抗CD19、PD-L1結(jié)構(gòu)域靶向并殺傷腫瘤細(xì)胞。目前處于II期臨床階段。

       GNC-035是百利藥業(yè)基于GNC平臺(tái)開發(fā)的四抗產(chǎn)品，同時(shí)靶向PD-L1/CD3/4-1BB/ROR1，目前正處于臨床I期試驗(yàn)階段。

       GNC-039靶向PD-L1/4-1BB/CD3/EGFR的四抗產(chǎn)品，針對(duì)的是晚期惡性實(shí)體瘤，特別是腦膠質(zhì)瘤。在靶點(diǎn)選擇上進(jìn)行差異化創(chuàng)新。2020年12月，GNC-039臨床試驗(yàn)獲CDE批準(zhǔn)。

       目前，在單抗競爭白熱化的背景下，多特異性抗體成為醫(yī)藥研發(fā)領(lǐng)域的熱點(diǎn)。國內(nèi)創(chuàng)新三抗藥物及四抗藥物不斷涌現(xiàn)，正反映了我國生物醫(yī)藥行業(yè)穩(wěn)步發(fā)展、欣欣向榮的趨勢(shì)。當(dāng)下中國的三抗領(lǐng)域仍處在早期階段，機(jī)制研究正處于萌芽階段，不過已經(jīng)開發(fā)了不同的技術(shù)途徑。未來或許會(huì)有更多生物醫(yī)藥企業(yè)利用自身研發(fā)優(yōu)勢(shì)不斷加入。值得注意的是，盡管三抗藥物增加了特異性抗原結(jié)合位點(diǎn)，降低了脫靶毒 性，但其療效和安全性仍需進(jìn)一步驗(yàn)證。

       參考：

       1.https://www.innate-pharma.com/media/all-press-releases/innate-pharma-announces-publication-preclinical-data-trifunctional-nk-cell-engager-acute-myeloid-leukemia-nature-biotechnology.

       2. Lan Wu et al.Trispecific antibodies enhance the therapeutic efficacy of tumor-directed Tcells through T cell receptor co-stimulation. Nature Cancer(2019).

       3. CDE官網(wǎng)、各公司官網(wǎng).