近年來，隨著中藥天然產(chǎn)物的研究深入，發(fā)現(xiàn)其活性單體和衍生物能通過抑制氧化應(yīng)激、調(diào)控血管活性物質(zhì)釋放、減輕機體炎癥、平衡凝血與抗凝血系統(tǒng)等途徑調(diào)控內(nèi)皮細胞功能，在內(nèi)皮保護和動脈粥樣硬化防治方面具有多途徑、多環(huán)節(jié)、多靶點的優(yōu)勢。（《上篇--中藥天然產(chǎn)物調(diào)控內(nèi)皮細胞干預(yù)動脈粥樣硬化的機制研究進展》）

         常見調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮細胞、影響動脈粥樣硬化的天然產(chǎn)物

       1、淫羊藿苷

       研究發(fā)現(xiàn)淫羊藿苷10, 30 mg/kg 在治療ApoE-/-小鼠和 HUVECs 中，能降低ROS產(chǎn)生，提高 eNOS 活性，增加內(nèi)皮依賴性的血管舒張，改善內(nèi)皮功能。同時，淫羊藿苷3.0 mg/kg 使大鼠血清中 NO、SOD 的含量顯著升高，降低乳酸脫氫酶（lactate dehydrogenase, LDH）、丙二醛（ malondialdehyde,MDA）含量，增強機體抗脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，提高機體清除氧自由基，減輕自由基損傷。另外，淫羊藿苷 10 mg/kg 可降低 VCAM-1、 ICAM-1 和 E-選擇蛋白的表達，抑制單核細胞和內(nèi)皮細胞的黏附，改善 As 病變。而淫羊藿苷5 mg/kg 能改善高膽固醇飲食家兔血清中甘油三酯(triglyceride, TG)、低密度脂蛋白膽固醇水平，降低血液流變學參數(shù)，抑制血小板聚集和脂質(zhì)代謝，從而降低 As 發(fā)生風險。

       2、葛根黃酮

       葛根總黃酮抗氧化和對內(nèi)皮細胞的保護作用主要體現(xiàn)在提高人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVECs)的存活率，降低 ROS 水平。葛根總黃酮 40, 80, 160 mg/L 可使超氧化物歧化酶(SOD)升高，導(dǎo)致 MDA 抗氧化作用下降，上調(diào) eNOS 的表達。葛根素是一種單一異黃酮，葛根素25～200μmol/L 具有較強的抗血小板聚集作用，其作用機制與抑制血小板釋放 5-羥色胺，抑制血小板生成 TXA2 有關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)，葛根素 50～100 mg/kg灌胃 21 天后，可以升高內(nèi)皮依賴性舒張功能因子 NO、 PGI2 的血清水平，使頸動脈內(nèi)膜/中膜比值顯著降低，再內(nèi)皮化區(qū)域顯著增加。同時，葛根素可通過提高血管活性物質(zhì)濃度，擴張血管，加速大鼠血管損傷部位的再內(nèi)皮化，抑制頸動脈新內(nèi)膜增厚，預(yù)防 As的發(fā)展。

       3、黃芪甲苷

       研究發(fā)現(xiàn)，黃芪甲苷20, 50, 100μmol/L 可以抑制 H2O2 刺激產(chǎn)生超陰離子的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶 4 表達，抑制 eNOS 解偶聯(lián)，提高 NO 的可獲得性。黃芪甲苷 50 mg/kg 可抑制異 丙 腎上腺素誘導(dǎo)的 SD 大鼠超氧陰離子的產(chǎn)生、阻止四氫生物蝶呤的氧化、提高 eNOS 和 NO 水平，表明黃芪甲苷可通過抑制 eNOS 解偶聯(lián)和NADPH 氧化酶-ROS-NF-κB 途徑來減輕氧化應(yīng)激，從而改善血管功能。另外有研究發(fā)現(xiàn)，黃芪甲苷 10, 20, 50 μmol/L 可以使細胞培養(yǎng)上清中促炎癥細胞因子 TNF-α 和 IL-6 表達減少，降低細胞凋亡，增加細胞活力。在高脂ApoE-/-小鼠誘導(dǎo) As 的研究中，黃芪甲苷 5 mg/kg 可降低組外周血清中 IL-6 和 TNF-α 水平，提高白細胞介素-10(interleukin-1, IL-10)水平。表明黃芪甲苷可以降低炎癥因子分泌，抑制炎癥反應(yīng)，抵御內(nèi)皮細胞的損傷。炎癥發(fā)生時，促炎細胞因子水平上調(diào)，增強 VCAM-1、ICAM-1 表達，促使白細胞黏附于血管內(nèi)皮細胞并穿過血管內(nèi)皮遷移至內(nèi)膜。

       4、三七皂苷

       三七總皂苷25, 50, 100 μg/mL 不同劑量均可使細胞活力和 SOD 活性增強，減少 MDA 和 ROS 生成，表明三七總皂苷可抵抗內(nèi)皮細胞氧化應(yīng)激損傷，進而改善As。三七總皂苷50, 100, 200 mg/kg，可不同程度上調(diào)氧化應(yīng)激相關(guān)基因(Nrf2、HO-1、SOD1和SOD2)的表達水平，具有顯著的體外抗炎抗氧化作用和體內(nèi)抗 As 斑塊形成的作用。三七總皂苷0.4, 0.8, 1.2 mg/L 隨著不同組別之間劑量增加，細胞上清液中 NO 分泌水平增加，ET-1 降低，同時檢測到 ET-1mRNA 表達降低，表明三七總皂苷對內(nèi)皮功能具有調(diào)節(jié)作用。在高脂肪兔誘導(dǎo) As 模型中發(fā)現(xiàn)，三七總皂苷 100 mg/kg 可提高血清NO 含量，增加NOS 活性，降低血清 ET-1含量。通過調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮細胞的活性物質(zhì)分泌，促進對內(nèi)皮細胞功能的保護。

       三七皂苷 100 mg/kg 能抑制整合素活化、黏附分子表達、以及白介素-18 和白細胞介素-1β(interleukin-1β, IL-1β)等炎癥因子的釋放。在使用三七皂苷治療后發(fā)現(xiàn) NF-κB/p65的表達被減弱，表明三七皂苷可通過抗炎作用和調(diào)節(jié)血脂分布對 As 產(chǎn)生治療作用，并涉及 NF-κB 信號通路，起到減輕 As 的作用。另外，三七皂苷 Rb1 0.01～10 μmol/L 可通過阻斷血小板膜上受體調(diào)控的鈣通道而減少凝血酶引起的細胞外Ca2+內(nèi)流作用，或直接抑制胞內(nèi)儲存Ca2+的釋放，降低血小板內(nèi) Ca2+濃度，從而共同抑制凝血過程的發(fā)生。

       5、丹參素

       研究發(fā)現(xiàn)，丹參素3～10 mg/kg 可通過 Akt-ERK1/2-Nrf2 信號通路降低肌酸激酶和 LDH 水平，清除 ROS的活性，增強內(nèi)源性抗氧化劑如 SOD、 過氧化氫酶(catalase, CAT)、 MDA、谷胱甘肽過氧化物酶(glutathione peroxidase, GSH-Px)和血紅素加氧酶-1(heme oxygenase-1, HO-1)的活性，改善血管內(nèi)皮細胞抗氧化防御系統(tǒng)。丹參素 67.5 mg/kg 能減輕“泡沫細胞”的聚集，減少泡沫細胞數(shù)量，降低主動脈內(nèi)皮細胞中促炎因子 TNF-α 和 ICAM-1 的表達，能保護血管內(nèi)皮。同時，丹參素 40 mg/kg 可以降低 VCAM-1 表達，抑制炎癥反應(yīng)，減弱 ApoE-/-小鼠的 As 發(fā)展。丹參的另一種提取物，丹參多酚酸鹽 100mg/L 能降低細胞 MDA 水平，降低炎性因子IL-6、IL-1β、TNF-α 的表達和釋放，增加細胞內(nèi)SOD 水平和 Nrf2 的表達，其機制可能與誘導(dǎo) HUVECs 細胞上調(diào) Nrf2，減輕炎癥級聯(lián)反應(yīng)，從而發(fā)揮保護內(nèi)皮的作用有關(guān)。另外發(fā)現(xiàn)，丹參多酚酸鹽 20 mg/kg 可降低高脂大鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6、MDA 含量，提高 IL-10、SOD、GSH-Px 含量，機制是通過調(diào)節(jié)脂代謝，抑制炎癥改善 AS。此外，丹參素具有優(yōu)良的抗血小板聚集和抗血栓形成的藥理作用其機制與抑制 TXA2 合成酶有關(guān)。

       丹酚酸B 是從中藥丹參中分離提取得到的一種水溶性成分，具有保護血管內(nèi)皮、改善微循環(huán)、抗炎、抗感染等作用。研究發(fā)現(xiàn)，丹酚酸B 50 mg/kg 可增加小鼠單核巨噬細胞系 RAW264.7細胞中的 HO-1 的活性，抑制精氨酸酶活性，減少活性氧的產(chǎn)生而增加離體小鼠主動脈NO 的生成，發(fā)揮抗 As 的活性。

       6、川芎嗪

       川芎嗪是從中藥川芎中分離提純得到的一種酰胺類生物堿，具有擴張血管，阻滯鈣通道、抗血小板聚集等功效。Ang-II 能誘導(dǎo)內(nèi)皮細胞產(chǎn)生大量 ROS，增強細胞內(nèi)超氧陰離子活動， 激活 ERK 和 JNK 磷酸化，導(dǎo)致內(nèi)皮細胞損傷，而川芎嗪100 mol/L 可抑制 Ang-II 誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細胞 ROS 生成、 ERK 磷酸化和 ET-1 基因表達，從而發(fā)揮保護內(nèi)皮細胞作用。川芎嗪 1, 10, 100 μmol/L 可通過抑制自由基產(chǎn)生、細胞脂質(zhì)過氧化、降低細胞培養(yǎng)上清液和細胞勻漿中MDA含量、LDH 釋放，增加SOD和GSH-Px的活性、胞漿磷脂酶 A2 磷酸化發(fā)揮抗氧化作用，從而改善血管內(nèi)皮細胞的氧化應(yīng)激損傷。同時，川芎提取物 600, 1200 mg/kg 不同程度上能抑制大鼠血清SOD、 總抗氧化能力活性的下降和 MDA 含量的升高，表明川芎提取物有良好的抗氧化活性，可增加心肌組織抗氧化能力，抑制氧化應(yīng)激。

       此外，川芎嗪能減少內(nèi)源性 AA 的釋放，溶解纖維蛋白原降低血液黏度，并抑制血小板聚集，具有良好的抗栓作用。鹽酸川芎嗪 80 mg/kg 對ADP 誘導(dǎo)的血小板聚集有明顯的抑制作用，對血小板內(nèi) TXA2 的分泌和細胞內(nèi) Ca2+動員均有明顯的抑制作用，川芎嗪具有抗血小板活性的作用，其機制與抑制 Akt 信號通路有關(guān)。研究表明，川芎嗪在 1.0～10 μmol/L 時，可通過 MAPK 和 NF-κB 信號通路抑制 ICAM-1 和環(huán)氧酶 2 的基因和蛋白表達，減弱內(nèi)皮細胞炎癥和黏附反應(yīng)。

       7、姜黃素

       姜黃素源自姜黃根莖，具有廣泛的藥理特性。研究發(fā)現(xiàn)姜黃素可通過抑制細胞凋亡和通過Akt/mTOR途徑誘導(dǎo)自噬來保護細胞免受氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的損傷。通過超聲檢測 FMD 用于非侵入性評估內(nèi)皮功能障礙發(fā)現(xiàn)，姜黃素可改善 FMD，從而改善內(nèi)皮功能障礙。姜黃素能明顯提高正常狀態(tài)下 HUVECs中酸性區(qū)室的積累，同時上調(diào) LC3-Ⅱ并降低p62 蛋白表達水平，證實姜黃素可提高 HUVECs 的自噬水平。此外，姜黃素明顯降低 HUVECs 的 p62、Akt、mTOR蛋白水平，進一步證實了姜黃素抑制HUVECs 的 Akt /mTOR信號通路。

       8、黃連素

       黃連素是一種異喹啉類生物堿，具有多種有益生物活性，在眾多藥用植物種屬中占有重要的地位。研究表明，黃連素通過自噬依賴性機制發(fā)揮抗炎作用，使 LC3II /LC3I 和 SQSTM1 /p62 比值增加，改善 AS 血管內(nèi)皮損傷，進而發(fā)揮對 AS 的治療作用。

       9、鉤藤總生物堿

       鉤藤總生物堿是從中藥鉤藤中提取的主要活性成分，能通過促進內(nèi)皮細胞自噬減少氧化應(yīng)激導(dǎo)致的 NF-κB、TNF-α等炎性反應(yīng)相關(guān)因子的表達，還被證實能夠增加受 H2O2氧化作用損傷的內(nèi)皮細胞中自噬小體的數(shù)量，并明顯提高自噬相關(guān)蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1 的表達，即通過促進自噬作用抵抗 H2O2的氧化損傷。

       10、黃芩苷

       黃芩苷是中藥黃芩的干燥根中提取分離出來的黃酮類化合物，具有顯著的生物活性，具有抗炎、抑菌、利尿及解痙作用。黃芩苷可增強斑塊穩(wěn)定性并抑制 AS 的發(fā)展，其作用機制與黃芩苷通過增強內(nèi)皮細胞自噬的特異性表達，使細胞能通過適當自噬作用清除自身損傷成分，控制斑塊脫落和 AS 發(fā)生發(fā)展進程有關(guān)。

       中草藥多源于天然植物，與西藥相比毒副作用較小，逐漸成為近年來的研究熱點。不過，目前對中藥復(fù)方具體作用機制的相關(guān)研究較少，雖然中藥單體、中藥有效組分作用靶點明確、作用機制清晰，但是中藥復(fù)方是中醫(yī)臨床治療的最重要手段，僅從中藥單體、中藥有效組分難以全面詮釋中醫(yī)學的臨床實際問題。因此，應(yīng)該在傳統(tǒng)中醫(yī)理論的指導(dǎo)下，深入探討中藥通過調(diào)控內(nèi)皮細胞干預(yù)動脈粥樣硬化的具體作用機制，尤其需加強對中藥復(fù)方的研究深度和力度。

       參考資料

       [1]雷雪麗,王震.中藥天然產(chǎn)物調(diào)控內(nèi)皮細胞防治動脈粥樣硬化的研究進展[J/OL].中國動脈硬化雜志:1-21[2022-11-22].http://kns.cnki.net/kcms/detail/43.1262.R.20221007.1505.006.html

       [2]趙立鳳,于紅紅,田維毅.中藥單體調(diào)控血管內(nèi)皮細胞自噬干預(yù)動脈粥樣硬化的研究進展[J].中華中醫(yī)藥學刊,2021,39(11):117-120.DOI:10.13193/j.issn.1673-7717.2021.11.028.

       作者簡介：小泥沙，食品科技工作者，食品科學碩士，現(xiàn)就職于國內(nèi)某大型藥物研發(fā)公司，從事營養(yǎng)食品的開發(fā)與研究。